lis通道号_求助TRPV1通道激活问题

最近在做TRPV1通道激活实验，做了好久没有激活电流，请教各位帮帮忙。

细胞：稳转TRPV1的CHO细胞，稳转细胞是买的

培养条件: F12不完全培养基(含双抗)，10% FBS，250 µg/mL G418, 1 µg/mL 四环素。辣椒素：DMSO配成10 mM的母液，使用时用外液稀释。

电极内外液：因为查文献的时候说钙离子容易是TRPV1通道脱敏，所以采用的是无钙外液，

Bath solution: NaCl 140 mM, EDTA 10 mM, glucose 10 mM, HEPES 10 mM (pH=7.4 NaOH)

Pipette solution: NaCl 140 mM, EGTA 5 mM, HEPES 10 mM, MgCl2 2 mM (pH=7.2 NaOH)

药物浓度：分别采用过100nM, 1 µM, 3µM的辣椒素进行刺激，均无电流

Protocol: Step 1 Step 2 Step 3 Step 4

0 -80 mV 80 mV 0

100 ms 400ms 400ms 100 ms

不知道哪里出了问题，希望各位大神能帮帮忙，多谢多谢！

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