细胞划痕实验怎么做?看看细胞划痕试验试剂盒
细胞划痕是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程,是研究细胞迁移的体外试验方法中最简单的方法。
传统的划痕实验,是细胞在培养孔中贴壁后,使用移液枪的枪头在贴壁细胞的中间划过,人为造成一道伤口(划痕),之后定时测量划痕的宽度,进而得到伤口愈合的细胞迁移数据。但是这种方式存在难以避免的缺陷:首先,因为是手动划痕,难以准确测量划痕的宽度,也无法保证每次划痕的一致性;其次,在划细胞的同时可能会对划痕的边缘细胞造成机械损伤,影响细胞的迁移和伤口的愈合。
艾美捷科技细胞划痕试验试剂盒 使用伤口愈合插件(insert)制造均一笔直的划痕。
名称 |
CytoSelect 24-Well Wound Healing Assay 24-孔细胞划痕试验试剂盒 |
Cat# |
CBA-120 |
组分 |
1. 24-well Wound Healing Assay Plate 2. Cell Stain Solution 3. DAPI Fluorescence Stain (1000X) 4. Fixation Solution |
原理 |
每24孔板包含12个经过zhuanli处理的塑料插件,培养细胞至形成单层状态后,移除插件,即可得到2块细胞区域之间的笔直又均一的划痕(0.9mm),用于测量细胞的迁移和增殖率。迁移细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。细胞增殖和迁移率可以使用手动固定和显微成像来确定。试剂盒中提供了固定液,用于在特定时间点终止细胞的迁移。还同时提供了细胞染色剂和 DAPI染料,便于通过光学和荧光显微镜查看结果。 |
计算 |
1.伤口闭合百分比= Migrated Cell Surface Area / Total Surface Area x 100(备注:Total Surface Area =0.9mm x length ;Migrated Cell Surface Area = length of cell migration (mm) x 2 x length ) 2.迁移率=length of cell migration(nm)/migration time(hr) |
结果图 |
|
原理流程图:
24孔板(12插件)示意图:
你还在手动划痕吗?该划痕实验试剂盒,使用伤口愈合插件(insert)制造均一笔直的划痕,实验重复性好,也不会刮坏细胞,也不会造成划痕的边缘的细胞有机械损伤。
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