酪氨酸脱羧酶丨Worthington粪链球菌酪氨酸脱羧酶的特征
酪氨酸脱羧酶催化酪氨酸中羧基的脱除,生成酪胺和二氧化碳。
5'-磷酸吡哆醛是一种必需的辅酶。通过利用在维生素 B6 缺乏培养基上生长的细胞制备的脱辅酶 (TYDAPO),可以测定磷酸吡哆醛。参见 Umbreit等人。(1945) 和 Gunsalus 和史密斯 (1957)。放射性标记的酪氨酸的脱羧作用允许测定更少量的磷酸吡哆醛(Maruyama 和 Coursin 1968;Sundaresan 和 Coursin 1970)。丙酮干燥的细胞被用作相对简单的脱辅基酶提取和纯化的来源。
全酶可用于以测压法或比色法测定酪氨酸、苯丙氨酸和二羟基苯丙氨酸。Tashian (1957) 报道了基于此原理测定尿液中酪氨酸的方法。血浆苯丙氨酸也可以使用这种酶来测定。最初的方法由 Udenfriend 和 Cooper (1953) 描述,修改已由 Hsia (1959) 和 Knox 和 Messinger (1958) 发表。Poisner (1960) 使用 Hsia 的方法测定了精神分裂症患者的血清苯丙氨酸水平,结果显着高于正常水平。
Boeker 和 Snell (1972) 对氨基酸脱羧酶进行了综述。另见 Snell 和 DiMari (1970)。
艾美捷Worthington粪链球菌酪氨酸脱羧酶的特征:
最佳 pH 值:5.5(Boeker 和 Snell 1972)。
特异性:L-苯丙氨酸和二羟基苯丙氨酸的作用速度比 L-酪氨酸慢得多。
抑制剂:重金属(Ag +、Cu 2+、Fe 2+、Fe 3+、Pb 2+)KCN、NHOH、N 2 H 4和SO 4=。
稳定剂:甘油 10-25%、巯基乙醇 (5 mM) 和 L-酪氨酸 (0.5 mM) (Chabner and Livingston 1970; Sundaresan and Coursin 1970)。
艾美捷Worthington酪氨酸脱羧酶测定方法:
此处使用的测定法基于 Gunsalus 和 Smith 的测定法(酶学方法,III,(Colowick, S. 和 Kaplan, N. 编辑),Academic Press, NY, 963, 1957)。在指定条件下,一个单位在 37°C 和 pH 5.5 条件下每分钟从 L-酪氨酸 产生 1 微摩尔 CO 2 。
试剂:
1.0.8 M 醋酸钠,pH 5.5
2.0.074 M 醋酸钠,pH 5.5
3.0.0065 M L-酪氨酸在试剂级水中。边搅拌边加热至 80°C 溶解。平衡至 37°C。(如果溶液冷却,可能会形成晶体)。
酶:
将酶溶解在 0.074 M 乙酸钠,pH 5.5 中,浓度为 2 mg/ml。在取出等分试样前立即混合均匀。
程序:
将以下移液器移入 Warburg 烧瓶的主孔中:
0.8 M 醋酸钠,pH 5.5 0.2 毫升
0.0065 M L-酪氨酸,37°C 2.3 毫升
移取 0.5 ml 酶悬浮液到烧瓶的侧臂中。包括一个不含酶的烧瓶作为空白,一个不含酶的烧瓶作为空白,一个装有 3.0 ml 试剂级水的烧瓶作为热气压计。将烧瓶连接到压力计。平衡 10 分钟后,关闭压力计,倾倒并混合底物,然后更换浴中的烧瓶。
确定以大约 5 分钟间隔释放 30 分钟的 CO 2微摩尔数。绘制释放的微摩尔 CO 2与反应时间的关系,并从曲线的线性部分确定每分钟释放的微摩尔。
Worthington核心酶:包括:胶原蛋白酶,脱氧核糖核酸酶I,弹性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
酪氨酸脱羧酶丨Worthington粪链球菌酪氨酸脱羧酶的特征相关推荐
- Worthington丨Worthington 中性蛋白酶说明书
艾美捷Worthington中性蛋白酶(Dispase®)是一种非哺乳动物动物源性无金属中性蛋白酶,通过沃辛顿开发的方法纯化.其温和的蛋白水解作用使该酶特别适用于制备原代细胞和次级(亚培养)细胞培养, ...
- Worthington丨Worthington 磷酸酶,碱性
艾美捷Worthington碱性磷酸酶是一个与碱性pHJ适的非特异性磷酸单酯酶相关的广义术语. 来源/单位定义: CAP:小腿肠.沃辛顿装置在37°C.pH 9.8下每分钟水解1µmol对硝基苯酚磷酸 ...
- worthington丨worthington 胶原酶取样程序
艾美捷worthington胶原酶取样程序: 当前可用的具有化验值的批次 交互式胶原酶批次选择工具 胶原酶原料认证 胶原酶是消化三螺旋区域中的天然胶原蛋白的内肽酶.胶原蛋白是动物细胞外结缔组织的主要纤 ...
- 无动物型胶原酶丨Worthington的多种应用方案
艾美捷Worthington胶原酶: • 纯化的胶原酶,代码:CLSPA/CLSPANK,含有最小的二次蛋白水解活性和高胶原酶活性. • 1 型部分纯化的胶原酶具有胶原酶.酪蛋白酶.梭菌蛋白酶和胰蛋白 ...
- Worthington丨Worthington胰蛋白酶化学性质及相关研究
胰蛋白酶是一种胰腺丝氨酸蛋白酶,具有基于带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链的底物特异性.它源自 34 kDa 无活性前体酶原胰蛋白酶原,在酶促去除 N 端 6 氨基酸前导序列后产生 23.8 kDa 胰蛋白 ...
- worthington酶丨worthington抑制剂的作用
艾美捷worthington抑制剂对酶活性的影响: 酶抑制剂是改变酶的催化作用并因此减慢或在某些情况下停止催化的物质.存在三种常见的酶抑制类型--竞争性.非竞争性和底物抑制. 大多数关于抑制机制的理论 ...
- Worthington公司弹性蛋白酶研究:分子特征和应用
弹性蛋白酶,由动物的胰脏用水提取而得,也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得. 弹性蛋白酶的用途: 在医学临床主要用于治疗高血脂症,防止动脉粥样硬化.脂肪肝.也可用于肉类和水产加工中的嫩化. 弹性蛋白 ...
- 粪菌移植——一种治疗人体疾病的新型疗法
谷禾健康 粪菌移植是一项近年来备受关注的医疗技术,它涉及将健康捐赠者的粪便物质转移至患有疾病或障碍患者的胃肠道. 简单来说就是选择健康合适的人粪便,通过科学方法提取出有用的微生物,去除有害与无用的部分 ...
- 环境污染物如何通过影响肠脑轴而影响心理健康
谷禾健康 在这个充满压力.紧张和焦虑的快节奏世界中,人人都容易患上许多身心疾病. 根据世界卫生组织 (WHO) 的数据,世界上每 8 人中就有 1 人患有精神障碍,其中焦虑症和抑郁症最为常见.尤其经历 ...
最新文章
- python做平面设计有前途吗_现在学平面设计还有发展前景吗?
- 复盘Spring中定时任务和异步线程池
- ios8来了,屏幕更大,准备好使用 iOS Auto Layout了吗?
- 普元EOS UTP自动化测试 关闭工作流
- win7与internet时间同步出错_电脑时间同步出错,教您电脑时间同步出错怎么办
- 在oracle中 缺失关键字,缺失关键字解决方案
- 用计算机里可以加50度电,一台电脑一天用多少度电?多少瓦?高配电脑一小时几度电?...
- 多进程与多线程的区别,和用途
- Android反编译工具与实践
- PHP正则表达式教程
- vue-router 源码和动态路由权限分配
- (1)一次意外的屠魔之旅
- Chicken first or egg?
- 组态王客户端显示服务器画面,组态王客户端显示服务器画面
- 论文集计算机,计算机学年论文集 计算机学年论文参考文献哪里找
- 苏州高铁新城打造区块链发展聚集地
- 怎样在WPS上实现代码语法高亮(转)
- 构造函数、深拷贝、浅拷贝
- 数字炸弹(shell)
- 算法题:护林员盖房子(C++)
热门文章
- 超级简单的复合运算计算器JAVA算法,含源码
- 服务学生发展 维护校园安全 创建平安校园 建设示范学校
- 编程,打印n*n(n<10)的螺旋方阵。
- java stream api 对象复制_Java 8新特性之旅:使用Stream API处理集合
- indicator function指示函数
- Tomcat10不支持javax的问题
- educoder基本SR锁存器+门控SR锁存器+与非门构成的门控SR锁存器
- springboot2整合drools规则引擎(kie-spring+drools-core)
- 华为HCIE RS笔记-03数据封装
- vue.runtime.esm.js?2b0e:619 [Vue warn]: Missing required prop: to