IHC/ICC 常见问题分析
今天我们介绍的是IHC/ICC中常见问题分析。
01
无染色
脱蜡不彻底:延长脱蜡时间,更换二甲苯。
固定步骤(使用福尔马林和多聚甲醛固定剂)修饰了抗体识别表位:抗原修复法暴露出抗原表位,缩短固定时间
蛋白位于细胞核内(核蛋白),抗体不能穿透核膜:在封闭液和抗体稀释液中加入通透剂
PBS缓冲液被细菌污染后破坏了靶蛋白的磷酸根:在抗体PBS储存液中加入0.01%叠氮化合物,或使用新鲜无菌的PBS
由于不当储存、稀释或反复冻融造成一抗/二抗试剂盒失效:做阳性对照确认一抗/二抗试剂盒的有效性
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