实验室代做实验项目

一、分子生物学检测服务

1、 引物设计合成(人、大鼠、小鼠、兔等)

2、 基因表达水平检测、内参检测

3、 SNP检测服务

4、 甲基化检测服务

5、 测序技术服务

6、 芯片检测(全基因、MicroRNA)

7、 染色体分析

二、病理形态学检测

1、 HE、特殊染色(PAS、MASSON等)

2、 电镜(透射、扫描、免疫透射等)

3、 免疫组化(阳性表达部位、阳性面积、阳性细胞计数、微血管密度、

淋巴管密度、光密度等)

4、 TUNEL研究细胞凋亡，常规病理细胞形态分析

5、 组织芯片

6、 原位杂交(DNA、RNA、MicroRNA等)

三、蛋白质技术服务

1、 免疫印迹(Western-blotting)分析

2、 蛋白质组学

3、 凝胶迁滞实验(EMSA)分析DNA或RNA结合蛋白

四、免疫学检测服务

1、 酶联免疫(ELISA)技术

2、 ***免疫(RIA)

3、 化学发光

4、 常规生化检测

五、代谢组学

GC-MS、LC-MS、NMR

实验标本收集及保存方法：

1：病理标本收集及保存：

1)冰冻切片：取下适当的组织块放于液氮保存；

2)石蜡切片：取下适当的组织块放于4%多聚甲醛保存；

3)细胞爬片：细胞爬片4%多聚甲醛固定30min，换PBS浸没4℃保存。

2：分子生物学标本收集及保存：

1)新鲜组织：切割标本后放于液氮或者-80℃冰箱保存；

2)石蜡标本：常温保存；

3)全血标本：取适量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管；

4)体液标本：高速离心取沉淀；

5)细胞标本：细胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。

3：蛋白质实验标本收集及保存：

1)新鲜组织：切割标本后放于液氮或者-80℃冰箱保存；

2)全血标本：取适量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管；

3)细胞标本：细胞加细胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。

4：ELISA、放免、生化实验标本收集及保存：

1)血清(血浆)样本：取全血加入促凝管(抗凝管)，2500转离心20分钟左右，收集上清，液氮或者-80℃冰箱保存；

2)尿液样本：样本2500转离心20分钟左右，液氮或者-80℃冰箱保存；胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液参照此实行；

3)细胞样本：检测分泌性的成份时，样本2500转离心20分钟左右，液氮或者-80℃冰箱保存；检测细胞内的成份时，用PBS稀释细胞悬液，通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份，2500转离心20分钟左右，收集上清同上；

4)组织样本：切割标本后，称取重量，用液氮或者-80℃冰箱冷冻保存备用。

5：代谢组学标本收集：

1)尿液样本：样本2500转离心20分钟左右，液氮或者-80℃冰箱保存；胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液等参照此实行；

2)组织样本切割标本后，称取重量，用液氮或者-80℃冰箱冷冻保存备用；

免疫学技术服务

酶联免疫(ELISA)技术服务

1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

***免疫(RIA)技术服务

***免疫分析(RIA)是以***性核素作示踪剂的标记免疫分析方法，它具有的高度灵敏性、特异性和精确性等特点，特别适用于***、多肽等含量微少物质的超微量分析。如：肿瘤类；心血管，肾病，内分泌类；多肽因子类；脑-肠肽类；胃肠病，骨代谢类；甲状腺功能类；糖尿病类；性腺类等。

检测价格：1)血清：30元/样本/指标；2)尿液：40元/样本/指标

试剂盒价格另计，由本中心购买可享受一定的优惠，提供实验操作步骤，分析数据。

普通生化及荧光分光光度计检测

根据反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其吸光度大小，对物质进行定量分析的方法。对一般化学反应来说，反应完全(或正、逆反应动态平衡)、反应产物稳定时为反应终点。对抗原一抗体反应来说，是抗原和抗体完全反应、形成最大且稳定的免疫复合物时为终点。常用的检测如：血常规、氧化应激、肝肾功能、离子检测等。

检测价格：15元/样本/指标，试剂盒价格另计；提供操作步骤，分析数据。

实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务

实时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差，提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的 mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。

SYBR Green荧光染料法

SYBR Green是一种DNA结合染料，能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下，它不发出荧光，但一旦结合到双链DNA中以后，便可以发出荧光。它的最大优点就是可以与任意引物、模板相配合，用于任意反应体系中。从经济角度考虑，它也比其它的探针的价格要便宜得多。但由于它能与所有的双链DNA结合，所以一旦反应体系中出现非特异扩增，那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性。要避免这种不利因素，可以通过选择良好的引物并优化反应条件以消除非特异性影响。

TaqMan荧光探针法

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

Western Blotting技术服务

免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting)，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。