在此我们对裂解介质的成分和他们如何帮助您的实验做一个深入的探讨。裂解介质颗粒的各种特性,不论是固有的还是选择的,可以产生很大的应用优势。

裂解介质的固有特性包括硬度成分密度选择的特性包括形状和大小

大小

研磨颗粒越小,得到的样本颗粒越小。研磨后得到的样本颗粒直径小于研磨颗粒。因此,请根据您希望得到的样本颗粒的大小来选择裂解珠。例如,如果您想得到完整有功能的细胞器,最好选择一个大一点的裂解介质。用较小的裂解介质有利于获得更小的结构体,如病毒粒子和芽孢。

形状

裂解介质的形状是决定裂解后样本组分形态的重要因素。诸如球体等钝的裂解介质,主要依靠碰撞力来裂解样本;而锋利的裂解介质主要依靠剪切力来裂解样本。剪切力更有利于打开难裂解的样本,适用于需要分离诸如DNA等稳定的分子成分。

RNA和一些特定的易降解的蛋白质易受到剪切力的破坏,而其他分子物质,如DNA,稳定的蛋白质(如抗体和胶原蛋白)、多糖结构、小分子物质(例如小的次代谢产物)对剪切力免疫,因此剪切力在分离上述物质和剪切功能时很实用。

硬度、密度和成分

成分决定了两个非常重要的参数:硬度和密度,这两个参数都是由裂解介质材料的内在特性得到的。裂解介质的硬度必须比样本的硬度高,这一点,MP的裂解介质都能达到要求,因此密度是一个重要参数。裂解介质的密度越大,对于孢子等难处理样本的研磨效果越好。

还有一点很重要的是,裂解介质颗粒需要比研磨的溶液密度更大,否则裂解介质漂浮在表面不能发挥裂解或者匀浆作用。裂解介质的其他特性也都是由它的分子结构决定的。例如电导率,融点,交叉反应性,但是在我们对裂解介质的精心选择下,不同珠子的这些特性对裂解试验的影响不显著

科诺普(Knoop)和莫氏(Mohs)

FastPrep®裂解介质的材料选择基于以上讨论的几点。一个重要的参数是材料的硬度,这个参数可以通过标准分析来评估,如下:

Knoops®硬度测试是一个脆性材料或薄膜的力学性能测试。用一个特定的力在已知的时间内作用于材料表面,导致表面出现一个小的凹痕,用显微镜来测试这个凹痕,并给于100-1000的打分,分值越高,硬度越大。

Mohs硬度反应了各种矿物质是否容易被划伤,用一种更硬的材料来刮擦较软的材料来评估。从1到10来计分,例如,宝石的莫氏硬度指数是10。

裂解介质特性图解

裂解介质管是样品处理系统的重要组成部分之一。研磨珠的大小及材质都是根据不同的样品处理需求研发、制造出来的。

您可以单独购买裂解介质管,并使用您自己常用的缓冲体系。也可以购买整套的纯化试剂盒,以获得最佳效果。

裂解介质A

每个抗压管里面包含有石榴石和1/4英寸的氧化锆珠。裂解介质A可以被用来裂解,研磨和匀浆坚硬和难磨的样本。介质的锋利性、棱角和不规则的表面使得裂解非常高效。石榴石可以被用来高效分离DNA,但是被应用于RNA和蛋白质的时候要尤其考虑到它对样本的裂解非常强烈。

裂解介质B

每个抗压管里面包含0.1 mm硅珠。裂解介质B是用来裂解革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的,同时也用来处理真菌和孢子。这种裂解介质也可以用作超声裂解的介质。

裂解介质C

每个耐压管中包含1 mm硅珠。裂解介质C被用来裂解酵母、真菌、孢子,也用于霉菌和藻类。

裂解介质D

每个抗压管里面包含1.4 mm陶瓷珠。裂解介质D用来裂解较软的组织,如脑、肝脏、肾脏、肺、脾等组织。也可以用来裂解植物组织,如叶、根、果实、培养的细胞和整个昆虫。研磨珠化学稳定,不会和核酸结合。

裂解介质E

每个抗压管包含1.4 mm陶瓷珠,0.1 mm硅珠和一个4 mm玻璃珠。裂解介质E主要被用于环境样品,如土壤、泥浆、废水和粪便。裂解介质E对于混合样本也很有效,如微生物感染的组织,并且可以被应用于肿瘤组织或者其他疑难样本中提取RNA。

裂解介质F

这种介质包含1.6 mm氧化铝颗粒和1.6 mm碳化硅颗粒。碳化硅相对密度低、强度高、硬度高,因此裂解粗糙的、坚硬的、脆的细胞膜十分有效,分离完整的细胞器、超分子等十分有效。提取RNA、蛋白质,应用于使用A管太过剧烈的样本。

裂解介质G

这种介质含1.6 mm碳化硅颗粒和2 mm玻璃珠。碳化硅相对密度低、强度高、硬度高,因此裂解粗糙的、坚硬的、脆的细胞膜十分有效,用于需要高碰撞力低剪切力的样本。玻璃珠破坏致病性酵母多糖和菌丝内感染的组织十分有效。

裂解介质H

这种介质含2 mm的玻璃珠和2 mm的黄色氧化锆珠组成。氧化锆有很高的密度,强度和硬度。因此可以有效地裂解非常坚硬的组织,适合于分离完整的细胞器和超分子结构。玻璃珠能有效破坏酵母多糖胶囊和菌丝内感染的组织。

裂解介质I

这种介质包含2 mm的氧化锆珠和4 mm黑色陶瓷珠。氧化锆有很高的密度,强度和硬度。因此可以有效地裂解非常坚硬的组织,适合于分离完整的细胞器和超分子结构。陶瓷珠能提供很高的碰撞力,可以裂解几丁质和蛋白质复合体,如节肢动物和甲壳类动物的骨骼。

裂解介质J

每一个耐压管中都含有2 mm的黄色氧化锆珠和1.6 mm氧化铝珠。氧化锆珠致密,坚硬抗压。可有效裂解坚硬困难的样本,包括在艰难或者密集外基质中的生物。

裂解介质K

每个2 mL的抗压管含0.8 mm的硅酸锆珠。裂解介质K是GeneCleanTM古老样本DNA试剂盒中的一部分。氧化锆致密坚硬,可以有效处理坚硬难处理的样本。体积小使得它更适合于研磨酵母孢子、胞囊、酵母多糖胶囊。

裂解介质M

这种裂解介质是由1/4英寸(6.35 mm)的氧化铝珠组成,用来打碎坚硬、脆的组织,这种研磨介质化学惰性强。不与其他核酸物质结合。适用于从疑难样本中提取RNA 。同时是从感染的组织中分离完整的细菌和酵母的良好选择。

裂解介质S

每个耐压管中包含由1/8英寸(3.175 mm)直径的不锈钢珠,用来打碎坚硬、脆的组织,用于从疑难样品中提取RNA和蛋白质。

裂解介质SS

每个50 mL耐压管中包含由1/4英寸(6.35 mm)不锈钢研磨珠,用来研磨坚硬、脆的组织,用于从疑难样本中提取RNA 。

裂解介质Y

每一个耐压管中包含0.5 mm钇稳定氧化锆珠,这些珠子非常致密坚硬,因此适合裂解艰难的细胞壁,裂解介质Y被用来裂解革兰氏阳性,革兰氏阴性细菌、真菌、组织、孢子、酵母、霉菌。

裂解介质Z

裂解介质Z包含2.0 mm钇稳定氧化锆珠,这些珠子非常致密因此可以用来裂解非常艰难的细胞壁,同时它光滑的外表面减少剪切。裂解介质Z被用来裂解动植物组织,强硬的茎,根和种子,整只昆虫。Z可以用来替代A来提取艰难组织中的RNA和蛋白质。

MP可提供全面的裂解介质,满足不同应用的需求相关推荐

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